PCR耗材知識大科普,你想了解嗎
            發(fā)布日期:2022/11/1 9:54:34
            PCR是一種敏感和有效的方法,用于在短時間內將單拷貝的目標DNA序列擴增至數(shù)百萬拷貝。

            因此用于PCR反應的塑料耗材必須避免存在污染物和抑制劑,同時又具有可保障最佳PCR效果的高質量。

            01

            塑料耗材組成

            材料

            PCR / qPCR耗材通常由聚丙烯制成,因為它是惰性的并且能夠承受熱循環(huán)過程中溫度的快速變化。聚丙烯的惰性性質使其對于反應物質的吸收降低至最小,確保獲取最佳的PCR結果。為了進一步保障在純度和生物兼容性方面的批次間一致性,應當在生產過程中使用全新未循環(huán)使用的醫(yī)學級或分子生物學級高品質聚丙烯原料。請注意,某些PCR / qPCR板邊框用更強的聚碳酸酯框 制成,以與高通量機器人應用兼容。

            顏色

            PCR管和板通常可提供多種不同的顏色形式,以便于對于樣品的視覺區(qū)分和鑒別,特別是在高通量實驗中。盡管耗材的顏色對DNA擴增沒有影響,但在設置實時PCR或qPCR 的反應時,與透明耗材相比,我們更推薦使用白色耗材,以實現(xiàn)靈敏和準確的熒光檢測。

            白色耗材通過阻止熒光折射出管(圖2A)來提高qPCR數(shù)據(jù)的靈敏度和一致性。折射被最小化時,更多的信號被反射回檢測器,從而增加信噪比(圖2B)。此外,白色管壁可阻止熒光信號傳遞至PCR儀模塊,避免被吸收或不一致地反射熒光信號,從而使重復實驗(圖1B)中的差異降至最低。在極少數(shù)情況下,如果熒光探測器由于白色孔的信號反射增強而過飽和,可以使用磨砂孔替代。

            02

            生產概況

            防止灰塵和生物學污染物

            為了避免可干擾DNA擴增的污染,PCR/qPCR塑料耗材應不含核酸酶和DNA的污染。盡管如高壓和輻射等滅菌方法可去除細菌和DNA酶,但這些方法并不能去除灰塵和DNA殘留。殘留的灰塵客戶可能會抑制PCR,而片段化的DNA依然可作為模板從而產生非特異性的擴增。

            因此,在生產這些塑料耗材時,從制模到最終的包裝都必須在具有顆粒數(shù)量限制的設施環(huán)境中進行。例如,100,000級潔凈室允許在立方英尺空氣中不超過100,000個直徑≥0.5μm的顆粒。這些類型的設施符合國際標準化組織(如ISO 9001 )規(guī)定的嚴格指導原則,以防止灰塵和生物污染。

            質量保證檢驗

            為了確保質量,生產商可能需要對PCR/qPCR塑料耗材進行視覺或物理檢驗其完整性,以確保對于反應成分保護。可以執(zhí)行物理測試來評估樣品孔的蒸發(fā),密封和電連續(xù)性以檢查泄漏。對于生物測試,塑料耗材會進行某些DNA目標分子的qPCR擴增,以評估核酸酶和人類DNA的污染。生產商對于經歷過這些嚴格檢驗的PCR/qPCR塑料耗材可提供相應的檢測報告書。

            聲明:本文章來源的稿件均為轉載,僅用于分享,如涉及版權等問題,請盡快聯(lián)系我們,我們第一時間更正,謝謝!


            主站蜘蛛池模板: 亚洲福利精品一区二区三区| 国产成人精品a视频一区| 国产一区二区三区在线观看影院| 一区二区免费国产在线观看| 亚洲综合一区二区三区四区五区| 视频一区视频二区制服丝袜| 无码人妻精品一区二区三区久久久| 亚洲成在人天堂一区二区| 日本一区二区三区在线视频观看免费| 国产吧一区在线视频| 久久久精品人妻一区二区三区四 | 怡红院美国分院一区二区| 亚洲国产精品一区二区久久hs| 中文字幕日本一区| 久久久久久一区国产精品| 区三区激情福利综合中文字幕在线一区亚洲视频1 | 中文乱码字幕高清一区二区| 一区二区免费视频| 农村乱人伦一区二区| 亚洲综合一区二区精品导航| 亚欧成人中文字幕一区| 日产精品久久久一区二区| 精品无码一区二区三区爱欲九九 | 亚洲欧洲一区二区| 亚洲一区综合在线播放| 久久无码人妻一区二区三区| 精品人妻系列无码一区二区三区 | 成人精品一区二区三区中文字幕| 黑人一区二区三区中文字幕| 日韩一区二区三区在线精品| 亚洲AV永久无码精品一区二区国产| 日本中文一区二区三区亚洲| 一区二区三区精品高清视频免费在线播放 | 亚洲国产综合无码一区二区二三区| 日韩视频在线观看一区二区| 亚洲一区视频在线播放| 精品一区二区三区四区| 久久精品免费一区二区| 成人精品一区二区激情| 欧洲亚洲综合一区二区三区| 日本一区二区三区在线网 |